NanoDrop one超微量分光光度計(jì)是一類很重要的分析儀器 ,無(wú)論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域 ,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測(cè)、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門都有廣泛而重要的應(yīng)用。NanoDrop one超微量分光光度計(jì)就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器，常用于核酸，蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。超微量分光光度計(jì)已成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。
核酸的定量是NanoDrop one超微量分光光度計(jì)使用頻率很高的一個(gè)功能，可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。每種核酸的分子構(gòu)成不一，因此其換算系數(shù)不同，定量不同類型的核酸，事先要選擇對(duì)應(yīng)的系數(shù)。測(cè)試后的吸光值經(jīng)過(guò)上述系數(shù)的換算，從而得出相應(yīng)的樣品濃度。
測(cè)試前，選擇正確的程序，輸入原液和稀釋液的體積，然后測(cè)試空白液和樣品液，但是實(shí)驗(yàn)并非一帆風(fēng)順。讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實(shí)驗(yàn)者比較頭痛的一個(gè)問(wèn)題。
NanoDrop one超微量分光光度計(jì)允許吸光值在一定范圍內(nèi)變化，即儀器有一定的準(zhǔn)確度和度。另外，還需考慮核酸本身物化性質(zhì)和溶解核酸的緩沖液的pH值，離子濃度等：在測(cè)試時(shí)，離子濃度太高，也會(huì)導(dǎo)致讀數(shù)漂移，因此建議使用pH值一定、離子濃度較低的緩沖液，如TE，可大大穩(wěn)定讀數(shù)。 樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素：由于樣品中不可避免存在一些細(xì)小的顆粒，尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在干擾測(cè)試效果。為了減少顆粒對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值在0.1-1.。在此范圍內(nèi)，顆粒的干擾相對(duì)較小，結(jié)果穩(wěn)定。從而意味著樣品的濃度不能過(guò)低或者過(guò)高。
后是操作因素，如混合要充分，否則吸光值太低，甚至出現(xiàn)負(fù)值，混合液不能存在氣泡，空白液無(wú)懸浮物，否則讀數(shù)漂移劇烈，必須使用相同的比色杯測(cè)試空白液和樣品，否則濃度差異太大。換算系數(shù)和樣品濃度單位選擇一致，不能采用窗口磨損的比色杯。
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